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鎳Ni柱L00666是大家在蛋白純化中,應用較多的一種純化柱料,屬于固定化金屬離子親和色譜中的一種,1975年由Porath等發明,其間不斷完善發展至今。過渡金屬通過與電子供體配基上,能與金屬離子相互作用的羧基或氨基的電負性元素(O,N),形成較穩定的金屬螯合物。在IMAC中,一個Ni2+有六個配位位點,被含有3,4或5個電子供體基團(配位位點)的螯合物固定在吸附劑上,而剩下未被占據的位點暴露于溶液中,能與組氨酸,半胱氨酸,和色氨酸的側鏈或組氨酸標簽的蛋白特異性結合。IMAC...
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eStainL1蛋白染色儀操作簡便,將凝膠用凝膠固定夾固定后放入儀器內,儀器將自動注入染色液以及脫色液,在儀器的正負極之間形成一個很高的電場。在電場驅動下,負極濾紙中帶有負電荷的考馬斯藍染料分子發生定向移動,與膠上的蛋白分子結合,完成染色過程。未結合的染料分子繼續移動,離開膠,完成脫色過程。具體操作步驟:步驟1:當您的凝膠電泳快結束時,打開eStainL1蛋白染色儀背部的開關,同時儀器蜂鳴,此時,儀器進行開機自檢,自檢結束后主屏幕下方燈亮。步驟2:在托盤中注入適量蒸餾水,以*...
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親和層析是一種根據生物分子之間的特異相互作用來分離蛋白的層析方法,如酶和底物、受體和配體、抗體和抗原。這種作用是特異性的也是可逆的,通過這種可逆的結合和分離來達到蛋白純化的目的。生物分子與親和層析介質上的配體通過共價鍵、范德華力、疏水力、靜電力等作用發生生物學專一性結合形成復合物,共價鏈接在載體表面的功能團配體上。蛋白質親和層析技術通過目標蛋白質與配體間通過特異性親和力吸附而達到分離純化的目的,具有生物專一性的特點,純化效率高。親和層析是應用生物高分子與配基可逆結合的原理,將...
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客戶在收到依科賽胎牛血清FSP500后的需立即確認胎牛血清有無異常,如血清有沒有出現融化情況、瓶口及瓶身有無出現碎裂、瓶口是否密封完整等情況。血清融化方法:建議產品使用梯度溶解法,將血清從-20℃冰箱取出后,于2-8℃解凍過夜,并在此過程中不時輕輕搖動使之溶解均勻。那么,細胞培養中出現的黑點是污染嗎?更換依科賽胎牛血清FSP500后發現細胞鏡下觀察有黑點,需要肉眼觀察細胞培養液有無混濁的情況出現,其次鏡下觀察細胞中的黑點是否有游動。如果細胞被污染,微生物則會大量繁殖,培養基就...
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血清的質量對實驗成敗起著關鍵性作用,但血清使用不當也可能會導致血清質量下降,造成細胞培養效果不理想。AusgeneX澳洲胎牛血清很珍貴,大家在血清使用時怎樣確定血清使用濃度?這個只能通過測試了。原則上血清添加量不要太多,通常分為5%、10%、20%幾檔。部分細胞原代提取時會使用20%血清,大部分細胞正常培養時會使用5%~10%的血清濃度。至于某一株細胞適應什么樣的血清濃度,還需要根據細胞特性、實驗目的做測試和調整。血清使用前需要離心嗎?這個問題有以下兩種可能:其一,因為血清融...
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eBlotL1快速濕轉儀是用來轉印蛋白的儀器,電泳轉印為轉移蛋白常用的方法,該技術有效、迅速,并且使得蛋白在凝膠中保持高分辨率。在凝膠中向印跡膜載體轉印分離的蛋白質的過程,即是電泳轉印法。因為此技術往膜上轉印蛋白GX、快速和準確,并且能夠使得蛋白在凝膠中保持高分辨率,在轉移印跡技術中得到廣泛的應用。eBlotL1快速濕轉儀準備工作:1、準備對緩沖液進行轉移,緩沖液的pH值.不要無故調整,如果儀器過熱出錯,那么可能選擇了不適合的緩沖液。2、通電以后,凝膠在轉移緩沖液中平衡,平衡...
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澳洲胎牛血清的正確存放與解凍是各位實驗家尤為關注的一個問題,在保證質量的前提下,胎牛血清的正確存放與解凍的方法總結如下:1、澳洲胎牛血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃的冰箱使之全融。但必須注意的是,溶解過程中必須規則的搖晃均勻;2、長時間儲存在2-8℃時,血清中的各種蛋白和脂蛋白可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此,推薦在-20℃以下存儲血清,避免反復凍融。3、建議血清硬保存在-20℃條件下。若存放于4℃時,請勿超過1個月。若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至恰當的滅菌容器...
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胎牛血清作為細胞生長*的重要營養來源一直備受科研人員重視,那么澳洲胎牛血清在參與細胞培養實驗都發揮著什么作用呢?胎牛血清,是胎牛血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等,這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。胎牛血清是細胞培養中用量很大的天然培養基,含有豐富的細胞生長必需...
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